廣東紫珠CallicarpakwangtungensisChun系馬鞭草科紫珠屬植物，又名止血柴、紫珠草、金刀菜等，分布于我國江西、廣東、貴州等地，并在江西萍鄉(xiāng)等地有廣泛栽培[1]。廣東紫珠以干燥莖枝及葉入藥，新收錄于2010年版《中國藥典》，具有收斂止血、清熱解毒之功效，民間主要用于治療偏頭痛、吐血、跌打腫痛和外傷出血，臨床主要用于治療宮頸糜爛出血、陰道炎及宮頸炎等，是“抗宮炎片”和“抗宮炎膠囊”等中成藥的主要原料藥材。

　　[摘要]應用各種色譜技術對廣東紫珠中咖啡酰基苯乙醇苷類化合物進行分離純化，采用NMR和質譜等波譜學手段對單體化合物進行結構鑒定。從廣東紫珠地上部位的醇提物中共分離得到10個咖啡酰基苯乙醇苷類化合物，鑒定為2′-乙酰基毛蕊花糖苷（1），管花苷E（2），毛蕊花糖苷（3），管花苷B（4），異毛蕊花糖苷（5），alyssonoside（6），2′-乙酰基連翹酯苷B（7），江藤苷（8），連翹酯苷B（9），金石蠶苷（10）。化合物4是首次從馬鞭草科植物中分離得到，化合物6是首次從紫珠屬植物中分離得到，化合物1，2，5，7均為首次從該植物中分離得到。

　　[關鍵詞]藥學論文發(fā)表,馬鞭草科,廣東紫珠,咖啡酰基苯乙醇苷

　　金石蠶苷和連翹酯苷B，作為2個比較常見的咖啡酰基苯乙醇苷類化合物，是廣東紫珠藥材質量控制的指標性成分，然而，對廣東紫珠中化學成分的報道多見黃酮類和三萜類化合物[2-4]，而咖啡酰基苯乙醇苷類化合物卻少有報道，直到最近，有學者通過LC-DAD-MS聯用技術從廣東紫珠提取物中鑒定出5個該類化合物[5]。作者對廣東紫珠地上部分的醇提物進行HPLC-DAD分析發(fā)現，一系列色譜峰表現出咖啡酰基苯乙醇苷類化合物的紫外光譜特征。因此，作者對廣東紫珠中主要的咖啡酰基苯乙醇苷類化合物進行分離純化鑒定，共得到10個苯乙醇苷類化合物，其中化合物4是首次從馬鞭草科植物中分離得到，化合物6是首次從紫珠屬植物中分離得到，化合物1，2，5，7為首次從該植物中分離得到。

　　1材料

　　DRX400型核磁共振儀（德國Bruker公司）；ZQ2000型質譜儀（美國Waters公司）；中低壓柱色譜儀（日本YMC公司）；制備液相色譜儀（日本Shimadzu公司）；SephadexLH-20（美國GEHealthCare）；半制備色譜柱SepaxAmethystC18column（10.0mm×150mm，5μm；美國SepaxTechnologies公司）；制備色譜柱UltimateXB-C18column（21.2mm×250mm，5μm；美國WelchMaterials公司），薄層色譜GF254硅膠預制板（10～40μm）和柱色譜硅膠（200～300目）均為青島海洋化工有限公司生產；乙腈（HPLC級，江蘇漢邦有限公司），其他試劑均為分析純；金石蠶苷、連翹酯苷B對照品（上海源葉生物科技有限公司，20mg/支，純度>98%）。

　　廣東紫珠采于2011年10月采自江西省萍鄉(xiāng)，經萍鄉(xiāng)市食品藥品監(jiān)督檢驗所黃光磊主任藥劑師鑒定為馬鞭草科植物廣東紫珠C.kwangtungensis的干燥地上部分，憑證保存于上海醫(yī)藥工業(yè)研究院中藥研究部。

　　2提取分離

　　廣東紫珠地上部位粗粉（5kg）用10倍量的60%乙醇回流提取2次，每次2h，合并提取液，過濾，濃縮至無醇味，上AB-8大孔吸附樹脂柱，15%乙醇除雜至洗出液近澄清，用40%乙醇洗脫，跟蹤色帶，至色帶全部洗脫下來，收集醇洗液，減壓濃縮得廣東紫珠干浸膏150g。干浸膏經過硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（5∶1～4∶1～3∶1～2∶1～1∶1）梯度洗脫，得到6個組分A～F。

　　組分C經ODS中低壓快速分離色譜，以乙腈水（2∶8～3∶7）梯度洗脫，得到組分C1～C4。組分C3經半制備HPLC（23%乙腈，流速2mL・min-1，檢測波長332nm）純化得到化合物7（40mg，tR=25.3min）；組分C4經半制備HPLC（25%乙腈，流速2mL・min-1，檢測波長332nm）純化得到化合物2（20mg，tR=24.0min），4（15mg，tR=27.4min）。組分D經ODS中低壓快速分離色譜，以乙腈水（2∶8～3∶7）梯度洗脫，得到組分D1～D3。D2經SephadexLH-20凝膠柱色譜得到組分D2a～D2c，D2a經制備HPLC（23%乙腈，流速10mL・min-1，檢測波長332nm）純化得到化合物6（60mg，tR=20.2min），1（40mg，tR=24.8min）；D2c經制備HPLC（21%乙腈，流速10mL・min-1，檢測波長332nm）純化得到化合物3（55mg，tR=19.7min），5（20mg，tR=23.2min）；D3經制備HPLC（23%乙腈，流速10mL・min-1，檢測波長332nm）純化得到化合物8（100mg，tR=28.6min）。組分E經ODS中低壓快速分離色譜，以乙腈水（1.8∶8.2～2.5∶7.5）梯度洗脫，得到組分E1～E3。組分E2經制備HPLC（20%乙腈，流速10mL・min-1，檢測波長332nm）得到化合物9（200mg，tR=20.2min），10（300mg，tR=24.5min）。

　　3結構鑒定

　　化合物1白色無定形粉末。ESI-MSm/z665[M-H]-。1H-NMR（CD3OD，400MHz）δ：7.59（1H，d，J=16.0Hz，H-7），7.04（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.94（1H，dd，J=2.0，8.4Hz，H-6），6.78（1H，d，J=8.4Hz，H-5），6.67（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.64（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.52（1H，dd，J=2.0，8.0Hz，H-6），6.26（1H，d，J=16.0Hz，H-8），4.98（1H，t，J=9.2Hz，H-4′），4.87（1H，t，J=8.4Hz，H-2′），4.80（1H，d，J=1.6Hz，H-1″），4.52（1H，d，J=8.0Hz，H-1′），4.05（1H，m，H-8a），4.00（1H，t，J=9.2Hz，H-3′），3.68～3.64（1H，m，H-8b），3.66～3.62（1H，m，H-6′a），3.63（1H，dd，J=1.6，3.2Hz，H-2″），3.59～3.53（1H，m，H-5′），3.53～3.49（1H，m，H-6′b），3.59～3.53（1H，m，H-3″），3.53～3.49（1H，m，H-5″），3.25（1H，t，J=9.2Hz，H-4″），2.69（2H，m，H-7），1.98（3H，s，2′-COCH3），1.07（3H，d，J=6.0Hz，H-6″）；13C-NMR（CD3OD，100MHz）數據見表1。以上數據與文獻[6]基本一致，化合物1鑒定為2′-乙酰基毛蕊花糖苷（2′-acetylacteoside）。化合物2白色無定形粉末。ESI-MSm/z649[M-H]-；1H-NMR（CD3OD，400MHz）δ：7.65（1H，d，J=16.0Hz，H-7），7.44（2H，d，J=8.8Hz，H-2，6），6.80（2H，d，J=8.8Hz，H-3，5），6.67（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.64（1H，d，J=1.6Hz，H-2），6.52（1H，dd，J=1.6，8.0Hz，H-6），6.32（1H，d，J=16.0Hz，H-8），4.99（1H，t，J=9.2Hz，H-4′），4.87（1H，t，J=9.2Hz，H-2′），4.80（1H，brs，H-1″），4.52（1H，d，J=8.0Hz，H-1′），4.05（1H，m，H-8a），4.00（1H，t，J=9.2Hz，H-3′），3.80（1H，m，H-6′a），3.68～3.60（1H，m，H-8b），3.64（1H，brs，H-2″），3.59～3.54（1H，m，H-5′），3.53～3.49（1H，m，H-6′b），3.53～3.49（1H，m，H-3″），3.53～3.49（1H，m，H-5″），3.25（1H，t，J=9.6Hz，H-4″），2.69（2H，m，H-7），1.98（1H，s，2′-COCH3），1.06（3H，d，J=6.4Hz，H-6″）；13C-NMR（CD3OD，100MHz）數據見表1。以上數據與文獻[7]基本一致，化合物2鑒定為管花苷E（tubulosideE）。

　　化合物3白色無定形粉末。ESI-MSm/z623[M-H]-；1H-NMR（CD3OD，400MHz）δ：7.58（1H，d，J=16.0Hz，H-7），7.05（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.95（1H，dd，J=2.0，8.0Hz，H-6），6.77（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.69（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.67（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.56（1H，dd，J=2.0，8.0Hz，H-6），6.27（1H，d，J=16.0Hz，H-8），5.18（1H，d，J=1.6Hz，H-1″），4.90（1H，t，J=9.2Hz，H-4′），4.36（1H，d，J=7.2Hz，H-1′），4.03（1H，m，H-8a），3.91（1H，dd，J=1.6，3.2Hz，H-2″），3.83～3.78（1H，m，H-6′a），3.81（1H，t，J=9.2Hz，H-3′），3.73（1H，m，H-8b），3.63～3.57（1H，m，H-6′b），3.63～3.57（1H，m，H-3″），3.63～3.57（1H，m，H-5″），3.56～3.50（1H，m，H-5′），3.39（1H，t，J=8.8Hz，H-2′），3.28（1H，t，J=9.2Hz，H-4″），2.79（2H，brt，J=7.2Hz，H-7），1.09（3H，d，J=6.4Hz，H-6″），13C-NMR（CD3OD，100MHz）數據見表1。以上數據與文獻[8]數據基本一致，鑒定化合物3為毛蕊花糖苷（acteoside）。

　　化合物4白色無定形粉末。ESI-MSm/z665[M-H]-；1H-NMR（CD3OD，400MHz）δ：7.59（1H，d，J=16.0Hz，H-7），7.04（1H，d，J=1.6Hz，H-2），6.91（1H，dd，J=1.6，8.0Hz，H-6），6.77（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.63（1H，d，J=1.6Hz，H-2），6.64（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.49（1H，dd，J=1.6，8.0Hz，H-6），6.26（1H，d，J=16.0Hz，H-8），4.90（1H，brs，H-1″），4.79（1H，t，J=9.2Hz，H-2′），4.50（1H，dd，J=2.0，12.0Hz，H-6′a），4.47（1H，d，J=8.4Hz，H-1′），4.36（1H，dd，J=5.6，12.0Hz，H-6′b），4.00～3.93（1H，m，H-2″），4.00～3.93（1H，m，H-5″），3.96（1H，m，H-8a），3.69～3.61（1H，m，H-8b），3.69～3.61（1H，m，H-3″），3.60～3.56（1H，m，H-5′），3.48（1H，t，J=9.2Hz，H-3′），3.40～3.35（1H，m，H-4″），3.37（1H，t，J=9.2Hz，H-4′），2.68（2H，brt，J=7.6Hz，H-7），1.97（3H，s，-2′COCH3），1.23（3H，d，J=6.4Hz，H-6″）；13C-NMR（CD3OD，100MHz）數據見表1。以上數據與文獻[6]基本一致，化合物4鑒定為管花苷B（tubulosideB）。

　　化合物5白色無定形粉末。ESI-MSm/z623[M-H]-；1H-NMR（CD3OD，400MHz）δ：7.59（1H，d，J=16.0Hz，H-7），7.04（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.67（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.88（dd，J=2.0，8.0Hz，H-6），6.77（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.53（1H，dd，J=2.0，8.0Hz，H-6），6.26（1H，d，J=16.0Hz，H-8），5.16（1H，brs，H-1″），4.49（1H，dd，J=2.0，12.0Hz，H-6′a），4.35（1H，dd，J=5.6，12.0Hz，H-6′b），4.32（1H，d，J=8.0Hz，H-1′），4.00～3.94（1H，m，H-2″），4.00～3.94（1H，m，H-5″），3.96（1H，m，H-8a），3.72～3.67（1H，m，H-8b），3.72～3.67（1H，m，H-3″），3.55～3.50（1H，m，H-5′），3.52（1H，t，J=8.8Hz，H-3′），3.42～3.37（1H，m，H-4″），3.40（1H，t，J=9.2Hz，H-4′），3.14（1H，t，J=8.4Hz，H-2′），2.77（2H，brt，J=7.2Hz，H-7），1.24（3H，d，J=6.4Hz，H-6″）；13C-NMR（CD3OD，100MHz）數據見表1。以上數據與文獻[9]基本一致，化合物5鑒定為異毛蕊花糖苷（isoacteoside）。化合物6白色無定形粉末。ESI-MSm/z769[M-H]-；1H-NMR（CD3OD，400MHz）δ：7.65（1H，d，J=16.0Hz，H-7″″），7.18（1H，d，J=2.0Hz，H-2″″），7.08（1H，dd，J=2.0，8.0Hz，H-6″″），6.81（1H，d，J=8.0Hz，H-5″″），6.68（1H，d，J=8.0Hz，H-5），6.65（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.57（1H，dd，J=2.0，8.0Hz，H-6），6.35（1H，d，J=16.0Hz，H-8″″），5.19（1H，d，J=1.6Hz，H-1），4.93（1H，t，J=9.2Hz，H-4″），4.90（1H，d，J=2.0Hz，H-1），4.36（1H，d，J=7.6Hz，H-1′），4.00（1H，m，H-8a），3.92（1H，d，J=9.6Hz，H-4a），3.90（1H，brs，H-2″），3.88（3H，s，3″″-OCH3），3.86（1H，d，J=2.0Hz，H-2），3.80（1H，t，J=9.2Hz，H-3′），3.78～3.72（1H，m，H-6′a），3.74～3.69（1H，m，H-5′），3.70（1H，d，J=9.6Hz，H-4′b），3.69～3.65（1H，m，H-8b），3.58～3.54（1H，m，H-3″），3.58～3.54（1H，m，H-5″），3.54（2H，s，H-5），3.49～3.56（1H，m，H-6′b），3.39（1H，t，J=8.8Hz，H-2′），3.29（1H，overlap，H-4″），2.79（2H，t，J=7.2Hz，H-7），1.09（3H，d，J=6.4Hz，H-6″）；13C-NMR（CD3OD，100MHz）數據見表2。以上數據與文獻[10]數據基本一致，鑒定化合物6為alyssonoside。