摘　要：筆者以瓜果腐霉菌、立枯絲核菌為指示病菌，通過多種不同因素篩選堆肥，對指示病菌具有抑制生長作用的微生物研究，希望為蔬菜生產中病害防治及堆肥的多功能應用提供參考性意見。

　　關鍵詞：堆肥;蔬菜土傳病;生防菌

　　1　材料與方法

　　1.1　材料農作物：黃瓜(由市場購買所得)，未經過特殊處理。材料：各種糞便、經過保濕處理的菜園土壤。培養基：細菌用牛肉膏蛋白胨培養基;放線菌用高氏一號培養基;真菌分離用馬丁氏培養基;病原菌和拮抗菌的對峙培養用。抗菌譜指示病原菌：瓜果腐霉菌;稻瘟菌;小麥赤霉菌;立枯絲核菌;辣椒疫霉菌;西瓜枯萎菌;番茄早疫菌;油菜菌核病菌 [1]。

　　1.2　方法在拮抗菌的篩選方面及抗菌譜的測定采用平板對峙培養法;重寄生菌的篩選參照對峙培養法。盆栽實驗：首先將從堆肥中篩選得到的放線菌接入高氏一號液體培養基中，溫度為 27 ℃ , 搖床 (150 r/min) 培養 6 d 后。黃瓜種子用 0.3% 次氯酸鈉溶液處理 25 min 后，再由無菌水沖洗 5 次，在土壤中，加 0.15% 的有機肥料，采用間歇濕熱滅菌法滅菌 5 次，間歇時間為 24 h，每次滅菌 50 min。實驗具體處理方式：所備好的無菌土壤嚴密封閉;所備好的無菌土壤只適用接種瓜果腐霉病菌;無菌土壤只適用接種立枯絲核病菌;無菌土壤同時接種瓜果腐霉病菌與拮抗菌;無菌土壤同時接種立枯絲核病菌與拮抗菌。拮抗菌接種量為 20mL，A10 培養液 (1mL 含 2×107 cfu);病原菌接種量為(1 土 100)mg 菌絲。實驗進行處理 5 次，每盆播 20 粒黃瓜種子， 12 d 后記錄每盆中的健康種子所成長的苗數，并且計算對成苗率 [2]。

　　2　結果

　　2.1　堆肥中生防菌的篩選經過 12 d 培養后，將所培植的對病菌具有抑制生長作用的菌株選出 30 株，其中，拮抗菌占絕大多數，重寄生真菌數量較少，分別為 25 株、5 株。在 25 株拮抗菌株中，瓜果腐霉病菌對 18 株無效，具有拮抗作用;立枯絲核病菌對 17 株無效，具有拮抗作用。其中，放線菌(代號 A1、A3、A5、A8、 A9、A10、A13、A14 及 細 菌 T12、 T15)對瓜果腐霉病菌和立枯絲核病菌同時具有效果，具有拮抗作用，其中放線菌 A10 的拮抗效果最為顯著，對瓜果腐霉病菌的拮抗帶寬度與拮抗菌菌落直徑為 7.45 mm;對立枯絲核病菌的 R2/R1 為 9.74。另一方面，在剩余的 5 株重寄生菌中，發現木霉 A11 的寄生能力最為顯著。根據培養大家發現，型號為 A11 木霉菌株能夠與分別與立枯絲核菌、瓜果腐霉菌培養 48 h 后在平板上菌絲交接在一起，并且木霉菌絲能夠覆蓋病原菌菌絲，然后在原有病原菌菌絲產生一種新的菌絲，生長迅速，完全不受病原菌的影響。計算公式為：病情指數 = ∑(各級病株數 × 相對應級別數)/(調查總株數 × 最高級值)×100。防治效果(%)=[ 對照病情指數 ( 或病株率 )- 處理病情指數 ( 或病株率 )]/ 對照病情指數(或病株率)×100%。

　　2.2　拮抗菌 A10 抗菌譜的測定及對黃瓜猝倒病、立枯病的防效部分放線菌對瓜果腐霉菌的拮抗效果見表 1。通過實驗結果可發現：放線菌 A10 拮抗能力強大，不僅對瓜果腐霉菌和立枯絲核菌對其無效同時，對椒疫霉菌、番茄早疫病菌等病菌都有較為顯著的抑制效果，抗菌層面巨大。在后續中，通過盆栽實驗結果顯示：對其 15 d 的培養后，無菌土壤在接種 A10 對疾病具有很強的防效性，在猝倒病和立枯病的防效分別達到 65% 和 50%，效果良好。

　　3　討論

　　農民利用各種糞便或是污泥所制作堆肥雖然成分復雜，但是對于蔬菜中的猝倒病、立枯病具有很強的防效性。在堆肥過程中，通過長時間發酵，它們之間互相融合，將所產的優質微生物集中起來，可以說是繼土壤之后又一個微生物資源庫 [3]。

　　4　結語

　　進入 21 世紀后，堆肥不再局限于農村，學者們對其強大的抑菌防病能力震驚不已，并且研究效果已初見成效，隨著人們節能環保意識的不斷提升，通過廢棄物資源而所制造的堆肥符合現代社會發展的方向。因此，目前人們對充堆肥在作物栽培的功效還有許多需要去探索的問題，促使堆肥作用變的更為合理、科學、有針對性。

　　參考文獻

　　[1] 孫睿 . 土傳病害現狀及防治對策 [J]. 吉林蔬菜 ,2012(6):43-44.

　　[2] 張俊奇.設施蔬菜土傳病 害 綜 合 防 控 措 施 [J]. 長 江 蔬菜 ,2012(10):69-70.

　　《堆肥中蔬菜土傳病害生防菌的篩選及評價》來源：《食品安全導刊》，作者：王薇。