本文是一篇 醫學畢業論文范文，發表在《廣東藥學院學報》上，雜志是由廣東省教育廳主管，廣東藥學院主辦，面向國內外征稿和發行的綜合性醫學術期刊;創刊于1985年，雙月刊;1994年改為《廣東藥學院學報》曾用名是《廣東醫藥學院學報》，規格為國際通用的A4開本，國內統一刊號：CN 44-1413/R，國際標準刊號：ISSN 1006-8783，郵發代號：國內 46-148 國外 BM 4496，每冊單價：10元，全年定價：60元。

　　【摘要】建立高效液相色譜法測定白花蛇舌草中槲皮素含量的方法。方法 采用Hypersil BDS C18色譜柱(4.6 mm×200 mm，5 μm)，流動相為甲醇�菜��擦姿�(體積比50∶50∶0.2) ，檢測波長為370 nm。結果 槲皮素在0.08～ 0.32 μg 的范圍內與峰面積呈良好線性關系(r=0.999 6)，平均加樣回收率為101.5%，RSD為0.8%(n=6)。結論 本法快速、簡便、準確，可用于測定白花蛇舌草中槲皮素的含量，為評價白花蛇舌草的內在質量提供科學依據。

　　【關鍵詞】 白花蛇舌草,槲皮素,含量測定,高效液相色譜法,醫學畢業論文范文

　　白花蛇舌草為茜草科植物白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.)的干燥全草，研究表明該植物主要含有黃酮類、三萜類、蒽醌類、環烯醚苷萜類、甾醇類、烷烴類等化學成分，具有抗肝炎、抗腫瘤、抗病毒、抗炎抑菌、降血脂及降血糖等多種藥理活性[1]。白花蛇舌草中黃酮類化合物的含量測定未見文獻報導，本文采用HPLC法測定了白花蛇舌草中槲皮素的含量，為評價白花蛇舌草的內在質量提供科學依據。

　　1 儀器與藥品

　　高效液相色譜儀：P230高壓恒流泵/DAD230二極管陣列檢測器(大連依利特分析儀器有限公司)，Hypersil BDS C18色譜柱(4.6 mm×200 mm，5μm，大連依利特分析儀器有限公司);電子精密天平(Ohaus);KS��1500超聲清洗器(寧波科勝儀器廠);高速萬能粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司)。

　　白花蛇舌草(市售，批號2006001，2006002，2006003)，經本校藥植教研室陳再興老師鑒定均為白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.);槲皮素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號100081-200406，供含量測定用);甲醇為色譜純;水為重蒸水。

　　2 結果與分析

　　2.1 色譜條件

　　色譜柱：Hypersil BDS C18色譜柱(4.6 mm×200 mm，5 μm)，流動相：甲醇�菜��擦姿�(體積比50∶50∶0.2);檢測波長：370 nm，流速：1 mL/min，柱溫：25 ℃ ，進樣量：20 μL。色譜圖見圖1、2。

　　2.2 對照品溶液的制備

　　精密稱取經五氧化二磷干燥過夜的槲皮素對照品適量，加甲醇制成每1 mL含槲皮素10 μg的溶液，即得。

　　3 樣品溶液的制備

　　取白花蛇舌草藥材粗粉1.0 g，精密稱定，置燒瓶中，精密加入50%(體積分數)甲醇20 mL和鹽酸1 mL，密塞，稱定重量，加熱回流2 h，放冷，用50%(體積分數)甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜 (0.45 μm) 濾過，取續濾液，即得。

　　2.4 系統適用性試驗

　　分別取對照品溶液、供試品溶液各20 μL進樣測定，理論塔板數為15 000，供試品溶液色譜圖中槲皮素峰與相鄰雜質峰的分離度大于1.5。

　　2.5 線性關系的考察

　　精密稱取經五氧化二磷干燥過夜的槲皮素對照品10.0 mg，加甲醇定容至100 mL，分別精密量取上述對照品溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mL 置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成系列濃度的溶液。分別精密吸取各溶液20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以槲皮素峰面積(A)為縱坐標，槲皮素進樣量(m)為橫坐標，繪制準曲線，得回歸方程為A=274.79m+54.43，r=0.999 6，結果表明槲皮素在0.08～0.32 μg范圍內與峰面積成良好線性關系。

　　2.6 精密度試驗

　　取槲皮素對照品溶液20 μL ，重復進樣6次分別測定峰面積為2 949，2 911，2 891，2 946，2 950，2 957， RSD為0.9%(n=6)，結果表明精密度良好。

　　2.7 穩定性試驗

　　取供試品溶液(批號2006001)，分別在2、4、6、8、10、12 h進樣，測得槲皮素峰面積為1 437，1 422，1 451，1 430，1 421，1 425，RSD為0.8%，結果表明供試樣品溶液在12 h內穩定。

　　2.8 重現性試驗

　　取同一批號的白花蛇舌草5份，按“2.3”制備樣品溶液，進行測定，測得槲皮素的峰面積為1 447，1 452，1 425，1 419，1 423，RSD為1.1%(n=5)，結果表明該方法重現性良好。

　　2.9 回收率試驗

　　精密稱取已知含量的白花蛇舌草(批號2006001)5份，分別加入槲皮素對照品適量，按“2.3”制備供試品溶液，測定含量，結果測得回收率101.8%，102.4%，101.9%，101.1%，100.4%，平均值為101.5%;RSD為0.8%。

　　2.10 樣品測定

　　分別取白花蛇舌草藥材3批(批號2006001，2006002，2006003)，按“2.3”制備供試品溶液，進樣測定，結果測得槲皮素質量分數分別為：0.091 3，0.085 7和0.088 0 mg/g。

　　3 討 論

　　3.1 文獻報道槲皮素的檢測波長為360nm[2,3]、254 nm[4] 、368 nm[5]，本文利用DAD二極管陣列檢測器對槲皮素對照品進行全波長掃描，結果最大吸收峰為370.2 nm，故選擇370 nm為檢測波長，見圖3。

　　3.2 實驗考察了不同比例的甲醇�菜疄榱鲃酉啵�最后確定流動相為甲醇�菜��擦姿�(體積比50∶50∶0.2)，柱溫25 ℃，流速1 mL/min，樣品中槲皮素達到良好的分離。

　　3.3 白花蛇舌草中黃酮類化合物的含量測定未見文獻報導，本文采用高效液相色譜法測定了白花蛇舌草藥材中槲皮素的含量，操作簡便、快速，可作為白花蛇舌草質量控制的有效手段。

　　【參考文獻】

　　[1] 鄭宏鈞，詹亞華.現代中藥材鑒別手冊[M].北京：中國醫藥科技出版社，2001：798.

　　[2] 潘馨.HPLC測定滿山紅中杜鵑素、槲皮素的含量[J].中國藥學雜志，2002，37(11)：862-864.

　　[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：化學工業出版社，2005：257.

　　[4] 盧文彪，曾元兒.HPLC法測定紫花杜鵑膠囊中槲皮素的含量[J].湖南中醫藥導報，2002，8(3)：133-134.

　　[5] 楊龍輝，伍丕娥，王天志.HPLC測定沙棘膏中槲皮素和異鼠李素的含量[J].華西藥學雜志，2002，17(2)：130.