中國獸醫(yī)學報最新期刊目錄

基于正交試驗的Pochonia chlamydosporia原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化及生物學功能分析————作者：郝陸瑤;劉泓佑;趙逢淼;馬園;馬成宇;李政憶;王瑞;

摘要：該本研究旨在構(gòu)建高效的厚垣普可尼亞菌（Pochonia chlamydosporia）原生質(zhì)體遺傳轉(zhuǎn)化體系，以促進基因轉(zhuǎn)化和遺傳改造及后續(xù)的生物學功能研究。通過正交試驗，本研究系統(tǒng)優(yōu)化了電轉(zhuǎn)化過程中電壓、穩(wěn)滲劑、電脈沖時間、核酸質(zhì)量濃度和原生質(zhì)體濃度等關(guān)鍵因素。結(jié)果顯示，最佳的電轉(zhuǎn)化條件為：電壓250 V、穩(wěn)滲劑為0.6 mol/L蔗糖溶液、電脈沖時間10 ms、質(zhì)粒濃度1%、原生質(zhì)體濃度1 × ...

驢源馬鏈球菌馬亞種sagA和aroA雙基因缺失菌株的構(gòu)建及其生物學特性分析————作者：劉冰;劉廣源;高楠楠;丁召亮;于杰;魏傳祿;李海靜;王華;董世山;董建寶;

摘要：馬腺疫是規(guī)模化養(yǎng)驢場最主要的高發(fā)疫病之一，嚴重影響著我國驢產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，疫苗接種是該病防制的有效途徑，而我國目前尚沒有該病的驢源菌株弱毒疫苗。本研究旨在為馬腺疫弱毒疫苗的研發(fā)提供侯選菌株。本研究以驢源馬鏈球菌馬亞種野毒株為研究對象，利用同源重組基因敲除技術(shù)，將編碼5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶的aroA基因以及編碼鏈球菌溶血素S毒素原的sagA基因進行人工敲除，獲得雙基因缺失菌株并對其毒力...

實時熒光LAMP法快速檢測轉(zhuǎn)基因豬的外源基因hCD46————作者：張真;李津;苗健;劉巍;李剛;李華斌;李春和;溫麗娟;趙瑞利;范君文;趙忠鵬;

摘要：為了建立快速、簡便、準確的檢測轉(zhuǎn)基因豬外源外源基因的方法。試驗采用了實時熒光LAMP法的檢測轉(zhuǎn)基因豬的外源基因。針對hCD46基因設計6條特異性引物，在63℃條件下，檢測時間在45 min以內(nèi)完成核酸擴增。通過實時熒光監(jiān)測儀監(jiān)測LAMP擴增中SYBR Green I染料在紫外熒光下激發(fā)的熒光信號強度，作為hCD46基因擴增的判定依據(jù)。結(jié)果表明：構(gòu)建的方法靈敏度高，最小可檢測低至4.4×10

金銀花提取物調(diào)控PI3K/AKT/mTOR通路抑制犬乳腺腫瘤細胞活性及機制研究————作者：孫真真;張玉珠;趙藝鴻;謝光洪;鄭慧華;

摘要：旨在探討金銀花提取物對犬乳腺腫瘤細胞的抗腫瘤活性及其潛在機制，本研究首先通過CCK-8法評估其對正常細胞（犬乳腺上皮細胞PETCC3059、小鼠乳腺上皮細胞EpH4-Ev）及腫瘤細胞（CHMm、CHMp）的毒性差異。結(jié)果顯示，正常細胞在0～20 g/L質(zhì)量濃度下未表現(xiàn)毒性，PETCC3059和EpH4-Ev分別在40、60 g/L時活性受抑；而腫瘤細胞CHMm和CHMp在5、2.5 g/L時即出現(xiàn)...

斯氏艾美耳球蟲ASP重組腺相關(guān)病毒的制備及體外活性檢測————作者：李亞歡;李超凡;陳夢閣;李新;王曉岑;張旭;宮鵬濤;張楠;李建華;

摘要：制備可表達斯氏艾美耳球蟲天冬氨酸蛋白酶的重組腺相關(guān)病毒（rAAV9-ZsGreen1-EsASP），并探究其體外活性。通過PCR擴增EsASP基因，利用同源重組法將重組腺相關(guān)病毒載體pAAV-IRES-ZsGreen1與EsASP基因相結(jié)合，構(gòu)建pAAV-ZsGreen1-EsASP表達質(zhì)粒；采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將pAAV-ZsGreen1-EsASP表達質(zhì)粒、pHelper和pAAV-RC9質(zhì)粒共轉(zhuǎn)...

DNA損傷應答調(diào)控新城疫病毒復制的研究————作者：董傳榮;金海林;劉新鑫;閆巍文;李虹瑾;尹仁福;

摘要：新城疫（Newcastle disease， ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus， NDV）引發(fā)的一種高度傳染性烈性禽病，持續(xù)威脅全球家禽養(yǎng)殖業(yè)。盡管目前已廣泛實施疫苗接種，但散發(fā)疫情依然頻發(fā)，提示其致病機制尚未被完全闡明，需探索新的防控靶點。DNA損傷應答（DNA damage response， DDR）是宿主維持基因組穩(wěn)定的重要機制，近年來被發(fā)現(xiàn)與病毒感染密...

檢測豬瘟病毒E^rns蛋白抗體的雙抗原夾心化學發(fā)光方法的建立————作者：楊梓涵;劉鐘迪;張藝瀟;左青山;宋啟超;王遵寶;郭藝迪;涂長春;龔文杰;

摘要：為建立一種特異性強、靈敏度高、操作高效便捷的檢測豬瘟病毒（classical swine fever virus， CSFV）E^rns蛋白抗體的方法，以便鑒別E2亞單位疫苗免疫和流行毒株感染的抗體。本研究將昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)表達純化的E^rns蛋白，分別與偶聯(lián)于固相載體-羧基磁珠和辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase， HRP），...

非洲豬瘟病毒p37重組蛋白對小鼠免疫原性分析————作者：黃穎;翟文竹;陶春豪;何宇恒;王振;儲媛媛;龐忠寶;朱鴻飛;賈紅;

摘要：旨在探究非洲豬瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）p37重組蛋白對小鼠的免疫原性。使用p37重組蛋白作為抗原，腹部皮下免疫C57BL/6J小鼠。首免后21 d進行二免，ELISA檢測血清特異性抗體水平；采用多因子技術(shù)檢測血清中細胞因子水平；二免7 d分離小鼠脾淋巴細胞，通過ELISpot檢測p37重組蛋白刺激后分泌IFN-γ的脾淋巴細胞數(shù)量，并用流式細胞術(shù)檢測C...

豬繁殖與呼吸綜合征病毒環(huán)狀RNA疫苗的構(gòu)建及環(huán)化條件優(yōu)化————作者：陶春豪;黃穎;王振;姜一曈;朱鴻飛;賈紅;

摘要：為構(gòu)建一種環(huán)化率高、便捷有效的環(huán)狀RNA(circRNA)疫苗制備體系，本研究采用基于Ⅰ型內(nèi)含子的內(nèi)含子外顯子置換(permuted intron exon, PIE)策略，構(gòu)建了綠色熒光蛋白(EGFP) circRNA,并對體外轉(zhuǎn)錄后(IVT)、一次環(huán)化后(IVC1)、二次環(huán)化后(IVC2)的RNA進行了circRNA環(huán)化率的比較，在對circRNA進行純化后將構(gòu)建的circRNA體系應用于豬繁...

豬流行性腹瀉病毒纖突蛋白抗原表位的表達及其納米抗體的篩選————作者：胡湘云;陳少梅;宣澤義;羅蒙和;潘銳;楊楷;奚玉蓮;曹艷紅;

摘要：為制備豬流行性腹瀉病毒(PEDV)纖突蛋白(S)抗原表位的納米抗體，并驗證其反應活性。本研究采用人工合成PEDV S蛋白抗原表位區(qū)域SN,通過原核表達系統(tǒng)構(gòu)建表達載體pCZN1-SN,對SN片段進行原核表達，經(jīng)Ni-NTA層析柱進行純化，利用噬菌體展示技術(shù)從天然納米抗體文庫中靶向篩選SN納米抗體，經(jīng)過3輪親和篩選，獲得陽性克隆并測序，選取反應活性最強的1株克隆進行原核表達，經(jīng)Western blo...

TPCK胰酶對豬流行性腹瀉病毒在Vero細胞上增殖的影響————作者：張大妹;楊柳;高廣亮;李紹梅;羅杰;付利芝;余遠迪;許國洋;

摘要：旨在探究甲苯磺酰基-L-氨基聯(lián)苯氯甲基酮（TPCK）胰酶對豬流行性腹瀉病毒（PEDV）在Vero細胞上增殖規(guī)律的影響。試驗通過在病毒增殖過程添加TPCK胰酶和常規(guī)胰酶，利用RT-qPCR技術(shù)，分析病毒吸附和入侵Vero細胞的變化規(guī)律，并通過生長曲線繪制、IFA鑒定和細胞活性檢測，解析PEDV在Vero細胞上的復制能力變化。結(jié)果顯示，TPCK胰酶和常規(guī)胰酶最適質(zhì)量濃度分別為1、6 mg/L;PEDV...

2022-2023年河南省豬圓環(huán)病毒2型流行病學調(diào)查及其在豬場內(nèi)的分布————作者：李振坤;袁晉;路浩;邢金超;李陽;董芳婷;徐盟龍;張越;魏戰(zhàn)勇;

摘要：為了解2022-2023年河南省豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)的流行變異及其在豬場內(nèi)部的分布情況，本研究使用熒光定量PCR方法對河南省18個市區(qū)規(guī)模化豬場的1 206份豬血液樣品和2個PCV2陽性豬場共318份豬只及環(huán)境樣品進行了PCV2檢測，并對陽性樣品進行ORF2基因測序和遺傳進化分析。結(jié)果顯示，河南省PCV2陽性率為7.05%(85/1 20...

豬源致病性大腸桿菌分離鑒定及毒力基因檢測和耐藥性分析————作者：劉碩琦;劉瑩;孟子薇;張靜雯;范京惠;左玉柱;

摘要：為了解河北省部分地區(qū)豬源大腸桿菌的致病性、耐藥性及其生物學特性，本研究從豬場采集的仔豬腹瀉糞便進行大腸桿菌分離鑒定，并對分離菌株進行藥敏試驗、生物被膜形成能力檢測、致病性試驗、毒力基因檢測、耐藥基因檢測以及系統(tǒng)進化分群鑒定。結(jié)果顯示，從腹瀉仔豬糞便中共分離到35株致病性大腸桿菌，其中多數(shù)為多重耐藥菌，至少對3種抗生素耐藥。分離菌對阿莫西林（88.57%）、氨芐西林（88.57%）、強力霉素（88....

不同來源雞源大腸桿菌的分離鑒定、分子分型及耐藥性致病性分析————作者：王佳宇;郝小靜;孫美玲;劉文華;

摘要：為了解大腸桿菌在不同種群雞的感染狀況，本試驗對煙臺地區(qū)3個孵化場的1日齡雛雞、死胚和9個肉雞養(yǎng)殖場的臨床病死雞以及淘汰種雞的1 950份樣品進行了大腸桿菌的分離鑒定；通過脈沖場凝膠電泳對分離菌株進行同源性分析；應用PCR進行毒力基因和血清型鑒定；通過接種雞胚確定致病性；通過藥敏試驗確定菌株耐藥性。結(jié)果顯示，共分離出116株大腸桿菌，其中成功分型的97株劃分為66個帶型；經(jīng)PCR檢測出15種毒力基因...

1株多源曼氏桿菌TbpB定點突變與免疫原性————作者：閆智豪;朱玉紅;時間;馬興懌;甘玲;郭建華;

摘要：多源曼氏桿菌（Mannheimia varigena,M.varigena）是引起牛呼吸道疾病的重要病原體。轉(zhuǎn)鐵結(jié)合蛋白B（transferrin binding protein B,TbpB）是一種直接暴露于細胞外膜的脂蛋白，不僅參與細菌鐵離子代謝，還是一種重要的毒力因子。為探究M.varigena的TbpB與牛轉(zhuǎn)鐵蛋白（bovine transferrin, bTf）結(jié)合關(guān)鍵氨基酸殘基突變對其...

牛多殺性巴氏桿菌交叉免疫保護性抗原蛋白PmCQ2-5175的篩選及效果評價————作者：熊盼;黃艷瀾;劉思渝;楊柳;趙光夫;李能章;何芳;彭遠義;

摘要：A型多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multocida,Pm)是引起牛肺炎等呼吸系統(tǒng)疾病的重要病原菌，嚴重制約我國養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展。目前，主要通過疫苗接種預防該病，但由于Pm血清型眾多，導致疫苗交叉免疫保護作用較差。因此，研發(fā)具有交叉保護作用的疫苗對防控Pm感染具有重要意義。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，PmCQ2Δcra對A、B、F等不同莢膜血清型菌株(PmA、PmB、PmF)均具有良好的免疫保...

中國山羊源睡眠嗜組織菌(Histophilus somni)的分離鑒定及致病性————作者：李富祥;高華峰;趙文華;

摘要：旨在對云南省1起山羊呼吸道疾病進行細菌病原鑒定，從患病山羊的肺臟樣品中分離到3株革蘭陰性小球桿菌（YN240861、YN240862和YN240863）,并對其進行了生化鑒定、16S rDNA基因序列相似性與遺傳進化分析、致病性試驗以及藥物敏感性檢測。鑒定結(jié)果顯示，3株分離株的生化特征與睡眠嗜組織菌（Histophilus somni,Hi.somni）模式菌株ATCC 43625^T

長沙地區(qū)養(yǎng)殖場利奈唑胺耐藥腸球菌的流行及基因組特征————作者：劉建勤;張建超;陳智;楊輝;朱紅剛;漆亮;陳小軍;

摘要：為了解湖南省長沙地區(qū)養(yǎng)殖場腸球菌的耐藥情況，采集豬、牛、雞和鵪鶉的肛拭子、糞便及環(huán)境樣本共596份，進行腸球菌分離和質(zhì)譜鑒定。采用瓊脂擴散法測定菌株對10種抗菌藥物的最小抑菌濃度(MIC),并通過全基因組測序(WGS)分析多位點序列分型(ST)、耐藥基因及毒力基因的分布情況。結(jié)果顯示，共分離出272株腸球菌，分離率為45.6%。分離菌株對頭孢西丁和頭孢噻呋耐藥率最高(68.9%和58.5%),其次...

雞毒支原體與雞滑液囊支原體雙重TaqMan熒光定量PCR方法的建立與應用————作者：董志民;王利麗;田向?qū)W;路超;張莉;鄢明華;

摘要：為快速檢測與鑒別雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum,MG)和雞滑液囊支原體(Mycoplasma synoviae,MS),本研究根據(jù)NCBI數(shù)據(jù)庫中2種病原的16S rRNA基因序列的保守區(qū)，分別設計引物和TaqMan探針，通過優(yōu)化反應條件，建立了一種可同時檢測MG和MS的雙重TaqMan熒光定量PCR方法，并對其特異性、敏感性、重復性和可靠性進行了驗證。結(jié)果顯示，該方...

腦心肌炎病毒樣顆粒疫苗的制備及免疫保護效果評價————作者：張艷芳;朱瓊;付杰;方耀輝;靳佳音;張丹娜;鄧菲;曹勝波;

摘要：腦心肌炎是由腦心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一種以腦炎、心肌炎為主要臨床特征的人畜共患傳染病。為探索有效的預防措施，本研究利用桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統(tǒng)，將EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭載體中，構(gòu)建重組桿狀病毒Ac-P12A-3C,并大量表達和純化了EMCV病毒樣顆粒(EMCV-VLPs),透射電鏡觀察顯示，EM...

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